化妝品安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)中的鼠傷寒沙門氏菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)(Ames)試驗(yàn)、哺乳動(dòng)物骨髓細(xì)胞染色體畸變檢測(cè)試驗(yàn)、動(dòng)物骨髓嗜多染細(xì)胞微核試驗(yàn)和小鼠精子畸形檢測(cè)試驗(yàn)介紹。
研究化學(xué)物誘發(fā)哺乳動(dòng)物染色體畸變的方法很多,微核試驗(yàn)以其簡(jiǎn)便、快速、具
有一定的敏感性,被廣泛用于遺傳毒理學(xué)研究中。
該試驗(yàn)是一種用體內(nèi)試驗(yàn)來(lái)檢查骨髓細(xì)胞染色體畸變的方法,特別適用于檢出紡錘體的部分損害而出現(xiàn)的染色體丟失或染色單體的無(wú)著絲點(diǎn)片段
小白鼠是微核試驗(yàn)的常規(guī)動(dòng)物,也可選用大白鼠,一般常用體重為25~30g的小鼠或體重為150~200g的大鼠,雌雄皆可,每個(gè)劑量組至少5只動(dòng)物,另外設(shè)溶劑對(duì)照組和陽(yáng)性物組。常用環(huán)磷酰胺做為陽(yáng)性對(duì)照物。
根據(jù)受試物理化性質(zhì)(尤其是水溶性脂溶性),確定受試物所用的溶劑,常用水、植物油(玉米油等)或吐溫-80等溶濟(jì)。劑量的選擇是很重要的,用藥量太低,會(huì)漏掉陽(yáng)性物,用藥量太大,可致動(dòng)物死亡,或因?qū)撬瓒拘宰饔锰珡?qiáng),致使嗜多染紅細(xì)胞受到抑制,難以獲得正確的結(jié)果。一般取受試物 LD50的1/2、 1/5、1/10、 1/20等劑量,以求獲得微核的劑量一反應(yīng)關(guān)系曲線。
給藥途徑視試驗(yàn)?zāi)康亩ǎS媒?jīng)口灌胃方式,建議采用30小時(shí)給藥法,即兩次給藥間隔24小時(shí),第二次給藥后6小時(shí)取材。
骨髓液的制取
動(dòng)物脫頸處死,打開胸腔,沿著胸骨與肋骨交界處剪斷,剝掉附著胸骨上的肌肉,擦凈血污,橫向切斷胸骨,暴露止髓腔,然后用小骨血鉗擠出胸骨骨髓液。
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